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二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS配置優(yōu)選原則

更新時間:2022-07-13  |  點擊率:1575

二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。將色譜對復(fù)雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點結(jié)合起來。LC-MS主要可解決:不揮發(fā)性化合物分析測定;極性化合物的分析測定;熱不穩(wěn)定化合物的分析測定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析測定等。本文由京科瑞達二手儀器分享一下 二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS配置優(yōu)選原則 ,期望對您有所幫助!


1.接口的優(yōu)選原則


ESI適合于中等極性到強極性的化合物分子,特別是那些在溶液中能預(yù)先形成離子的化合物和可以獲得多個質(zhì)子的大分子;


APCI不適合可帶多個電荷的大分子,其優(yōu)勢在于弱極性或中等極性的小分子的分析。


2.正、負離子模式的優(yōu)選原則


正離子模式:適合于堿性樣品,可用乙酸或甲酸對樣品加以酸化。樣品中含有仲氨或叔氨時可優(yōu)先考慮使用正離子模式。


負離子模式:適合于酸性樣品,可用氨水或三乙胺對樣品進行堿化。樣品中含有較多的強伏電性基團,如含氯、含溴和多個羥基時可嘗試使用負離子模式。


3.流動相的優(yōu)選原則


常用的流動相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發(fā)鹽的緩沖液,如甲酸銨、乙酸銨等,還可以加入易揮發(fā)酸堿如甲酸、乙酸和氨水等調(diào)節(jié)pH值。


二手LC-MS接口避免進入不揮發(fā)的緩沖液,避免含磷和氯的緩沖液,含鈉和鉀的成分應(yīng)<lmmol/l。(鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染儀器)含甲酸(或乙酸)<2%。含三氟*酸≤0.5%。含三乙胺<l%。含醋酸銨<10一5 mmol/l。


送樣前一定要把握好LC條件,能夠基本分離,緩沖體系符合MS要求。


4.流量和色譜柱的優(yōu)選原則


不加熱ESI的上佳流速是1—50ul/min,應(yīng)用4.6 mm內(nèi)徑LC柱時要求柱后分流,目前大多采用 l—2.1 mm內(nèi)徑的微柱,TIS源建議使用200—400ul/min


APCI的上佳流速~lml/min,常規(guī)的直徑4.6mm柱zui合適。


為了提高二手LC-MS分析效率,常采用< 100 mm的短柱(此時UV圖上并不能獲得*分離,由于質(zhì)譜定量分析時使用MRM的功能,所以不要求各組分沒有*分離)。這對于大批量定量分析可以節(jié)省大量的時間。


5.輔助氣體流量和溫度的優(yōu)選原則


霧化氣對流出液形成噴霧有影響,干燥氣影響噴霧去溶劑效果,碰撞氣影響二級質(zhì)譜的產(chǎn)生。


操作中溫度的選擇和優(yōu)化主要是指接口的干燥氣體而言,一般情況下選擇干燥氣溫度高于分析物的沸點20℃ 左右即可。對熱不穩(wěn)定性化合物,要選用更低的溫度以避免顯著的分解。


選用干燥氣溫度和流量大小時還要考慮流動相的組成,有機溶劑比例高時可采用適當?shù)偷臏囟群土髁啃∫稽c的。

 

 

 

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